【药品名称】

通用名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)

英文名称：Diagnostic Kit for Antibody to Human Immunodeficiency Virus  (ELISA)

汉语拼音：Renlei Mianyi Quexian Bingdu Kangti Zhenduan Shijihe ( Meilianmianyifa)

【包装规格】

96人份/盒

【预期用途】

用于血液的筛查和临床HIV病毒感染的辅助诊断。

【检验原理】

采用EIA双抗原夹心法检测，在预包被有HIV抗原的反应孔内加入待测标本，若标本中有抗-HIV，则可在微孔板表面形成抗原-抗体复合物，再与酶标抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经显色系统显色后，根据OD 值判定有无HIV抗体的存在。

【主要组成成份】

1、HIV抗原包被板                   96孔×1块

2、酶结合物　　　　　　　　　　    12ml×1瓶

3、HIV-1阳性对照　　               1.0ml×1瓶　

4、HIV-2阳性对照　　　             1.0ml×1瓶

5、阴性对照                         1.0ml×1瓶

6、浓缩洗涤液：用前每瓶1:20稀释    50ml×1瓶

7、显色剂A                    　    6ml×1瓶

8、显色剂B　　　　　　　　　　　    6ml×1瓶

9、终止液                            6ml×1瓶

10、封板胶纸                           2片

11、说明书                           1份

【储存条件及有效期】

2～8℃避光保存12个月。

【适用仪器】

1、微量移液器和洁净的吸头

2、37℃恒温箱或水浴箱

3、计时器

4、洗板机

5、振荡器

6、酶标仪 检验波长450nm，参考波长630nm

【样本要求】

1、样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术收集血液，全血样品最好先放置37℃静置2小时，再将血样品充分离心，3000转/分钟离心10分钟以上，使血清或血浆不含或极少含血细胞。如果为抗凝血样品，应将血样品充分离心后，最好再放置室温2小时以上。

2、样本可使用血清或血浆，柠檬酸、肝素或EDTA等抗凝剂不会影响试验结果。

3、样本中含叠氮钠会影响试验结果，高度溶血的样本，没完全收缩的血清样本或微生物污染的样本可能会引起错误的结果。

4、新鲜的样本在2～8℃无菌条件下可保存一星期，可长期储存在-20℃或以下，避免反复冻融。

【检验方法】

1、每次试验设阴性两孔、HIV-1阳性对照和HIV-2阳性对照各两孔，分别加入阴、阳性对照100μl，再设一孔空白对照，其余孔加入100μl被测样本，置37℃温育60分钟。弃去孔内样品，扣干。

2、洗板：

1）手工洗板：弃去反应板条孔内液体，在吸水纸上拍干；用洗涤液注满每孔，勿溢出，静置5～10秒，弃去孔内洗涤液，拍干，如此反复5次，拍干。

2）洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，洗液应注满每孔，并确保每次吸净无残留，最后在吸水纸上拍干。

3、每孔加酶结合物100μl（空白对照孔不加），置37℃温育30分钟，同上法洗反应板5次。

4、每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，37℃避光静置30分钟。

5、 每孔加入终止液50μl终止反应，用酶标仪读数，可选择 450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。读数须在终止反应后10分钟内完成。

【参考值】

1、试验设计要求HIV-1阳性对照和HIV-2阳性对照平均值均大于1.20，阴性对照平均值小于0.10，阳性、阴性对照OD值之差应大于1.20，否则本次试验无效。

2、若阴性对照读数小于0.05时，按0.05计算。

3、临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.10。

4、测试标本的OD值小于临界值则为HIV抗体阴性。

5、测试标本的OD值等于或大于临界值则为HIV抗体阳性。（注意：初试阳性标本应重新取样进行双孔复试，复试阳性者应按“全国艾滋病检测管理规范”送HIV确证实验室进行确证试验）。

【检验结果的解释】

1、阴性结果表明样本中不含有抗-HIV，或样本中的抗-HIV含量低于试剂盒的检测范围。

2、阳性结果表明样本中含有抗-HIV，或非特异反应素。

3、阳性结果的样本需要再进行重复试验，只有经过重复或再重复试验仍为阳性结果的样本，可认为是HIV阳性。所有重复结果为阳性的样本应经过适当的手段进行确认。

阳性结果的样本如复检为阴性结果应被认为是阴性样本。重复不出阳性结果可能属于下列一个或多个技术问题引致：

1） 由于仪器或加样器造成的交叉污染。

2） 显色剂被金属离子污染。

3） 由于试剂滴漏造成的交叉污染。

4） 不充分的洗板或最后吸去不彻底。

【试验方法的局限性】 

本品仅用于检测血清或血浆中抗-HIV，用于临床人类免疫缺陷病毒感染的辅助诊断。

【产品性能指标】

1、检测HIV抗体国家阴性参考品，应符合要求。

2、检测HIV抗体国家阳性参考品，应符合要求。

3、用6份HIV抗体国家最低检出限参考品，阳性反应不得少于3份，且基质血清为阴性。

4、用1份HIV抗体国家精密性参考品进行检定，CV(%)应不高于15%(n=10)。

5、稳定性实验：试剂各组分置37℃至少6天，检定结果应达到标准。

【注意事项】

1、 本品仅用于体外诊断，仅限于检测人体血清、血浆；检测结果作为诊断指示之一。

2、 从2～8℃条件下取出的样本应置室温平衡30分钟再进行检测。

3、 须确保样品加样量的准确，如果加样不准确，可能会导致错误的试验结果。

4、 使用微量移液器手工加样时，应每次更换吸头吸取样本。

5、 在操作过程中应尽量避免反应微孔中产生气泡。

6、 浓缩洗涤液系高浓度磷酸盐，可能会形成结晶，如未完全溶解，会影响试验结果，同时可能会堵住自动加样器或洗板机管道。若出现结晶，请放置37℃充分溶解，然后稀释混匀使用。

7、 封板胶纸不能重复使用。

8、 用水浴锅时，请将反应板浸放于水中1/3，底部以网格支撑物支撑，水温控制在37℃。

9、洗板：

1）以洗板机洗板时，洗板机的加液量至关重要，既避免洗液过量溢出，又能充满反应微孔中，洗板次数不应该少于5次，并经常注意检查加液头是否堵塞。

2）手工洗板时，请勿使用带纸屑的吸水材料拍板，以防外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物质与显色剂发生反应，影响检测结果的准确性。

3）洗板时所用的吸水纸请勿反复使用。

4）洗板机最好在每次使用前、后，用蒸馏水或去离子水清洗干净，以防止管道堵塞或腐蚀。

10、如使用全自动酶标分析系统，可能会存在系统的误差，应对系统参数设定做适当调整，以满足国家相关质控品要求。

11、如果有任何试剂接触皮肤和眼睛，必须用大量清水对该部位进行扩大清洗和消毒；终止液为硫酸，具有腐蚀性。

12、试剂盒内有关组份及临床样本均视为有潜在传染性，请按相关的实验室工作规范来执行和处理。